紫外可見分光光度計檢定規(guī)程適用于新制造、使用中和修理后的波長范圍為190~850nm或以上述區(qū)域為主要譜區(qū)的單光束紫外可見分光光度計進行檢定,以保證其測試結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
根據(jù)實踐經(jīng)驗,為快速可靠地檢定紫外可見分光光度計,可按以下程序進行檢定:
外觀→絕緣電阻→穩(wěn)定度→電源電壓影響→基線平直度→噪聲→波長準(zhǔn)確度與重復(fù)性→靈敏度、Z小光譜通帶→吸收池配套性→雜散輻射率→透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性
先將紫外可見分光光度計預(yù)熱20min,在通電預(yù)熱的同時,可進行外觀檢查。必須注意,波長準(zhǔn)確度與波長重復(fù)性的檢定,一定要在儀器穩(wěn)定度合格的條件下進行,接著可進行靈敏度或Z小光譜帶寬的檢定。
當(dāng)用標(biāo)準(zhǔn)溶液對透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性以及雜散輻射率進行檢定前,需對吸收池配套性進行檢定,因為吸收池不配套就將給透射比正確度的檢定帶來誤差,所以這種順序不要倒置。當(dāng)然也有的計量部門用自己的洗后吃給用戶檢定儀器,這樣做的結(jié)果檢定誤差較小,但與實際使用情況有所脫節(jié)。所以應(yīng)該將用戶的吸收池檢定后,誤差大的一只裝空白溶液,其余裝待測溶液,這樣檢定的透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性才準(zhǔn)確可靠,對用戶使用紫外可見分光光度計也更具有實際意義。
紫外可見分光光度計具體檢定過程如下:
1、外觀及初步檢查
紫外可見分光光度計各調(diào)節(jié)器應(yīng)調(diào)節(jié)自如。鎢燈和氘燈應(yīng)能正常啟輝,儀器的波長度盤置于580nm處,在樣品室內(nèi)應(yīng)能觀察到光亮均勻、邊緣均勻的黃色光斑,光斑的亮度應(yīng)隨狹縫寬度的增大而增強。
2、波長準(zhǔn)確度與波長重復(fù)性的檢定
首先開啟氘燈,將光源選擇開關(guān)轉(zhuǎn)到氘燈位置,量程選擇開關(guān)調(diào)至0~1**%T,靈敏度開關(guān)轉(zhuǎn)向低(LOW)位置,波長調(diào)至486.00nm譜線。
調(diào)節(jié)調(diào)零旋鈕,使數(shù)字表顯示0000.0,關(guān)閉樣品室蓋,調(diào)節(jié)光亮旋鈕,使數(shù)字表顯示050.0。調(diào)節(jié)波長旋鈕,從短波方向緩慢轉(zhuǎn)動到486.00nm附近,觀察數(shù)字表顯示Zda值時的波長,重復(fù)三次。
然后關(guān)閉氘燈,開啟鎢燈,用標(biāo)準(zhǔn)鐠釹濾光片的529.8nm和807.7nm的吸收峰做參考波長,再次測量波長準(zhǔn)確度。接著關(guān)閉氘燈和鎢燈,打開光源室蓋,設(shè)法將汞燈的窗口對準(zhǔn)光源入射孔,臨時固定好。
Z后開啟汞燈光源,預(yù)熱至發(fā)光穩(wěn)定,即可對波長進行檢定。如數(shù)字表顯示很小的數(shù)字,則說明石英汞燈光亮不夠,應(yīng)重新對準(zhǔn)。確實對準(zhǔn)后,數(shù)字表的數(shù)字值若仍然很小,應(yīng)提高紫外可見分光光度計的靈敏度,即將靈敏度開關(guān)撥向“HIGH"(高)位置。
3、靈敏度
將棱鏡式紫外可見分光光度計波長分別置于200.0nm、625nm處,調(diào)節(jié)暗電流為零后,打開光門,調(diào)節(jié)狹縫寬度,使透射比示值為1**%,讀取相應(yīng)的狹縫寬度。
Z小光譜帶寬光柵型紫外可見分光光度計用汞燈435.83nm或儀器固有的氘燈的特征譜線,如656.1nm(656.3nm)。該儀器為自動掃描式儀器,可直接掃描譜圖,也可手動操作,將儀器波長度盤由短波向長波方向移動,記錄ZX波長兩側(cè)透射比值下降50%時的波長讀書λ之差,即為紫外可見分光光度計實際光譜帶寬。